日韩av老熟女-久久播亚洲视频-国产精品久久久系列-日韩激情96久久-欧美亚洲熟女另类-久久人妻诱惑我-久久高清黄又色视频-日韩av中文字幕网站-日韩人妻精品中文字幕,日韩成人在线不卡av,国产精品一香蕉av,婷婷久久综合久久久

預(yù)存
Document
當(dāng)前位置：文庫(kù)百科 ? 文章詳情
如何進(jìn)行冷凍切片檢測(cè)？步驟詳解
來(lái)源： 時(shí)間：2024-12-16 10:14:43 瀏覽：4520次

如何進(jìn)行冷凍切片檢測(cè)？步驟詳解

 

冷凍切片檢測(cè)是一種在病理學(xué)和生物科學(xué)研究中廣泛使用的技術(shù)，它允許快速制備組織樣本以進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析、免疫組化或免疫熒光等實(shí)驗(yàn)。

以下是詳細(xì)的步驟介紹，包括從取材到分析的整個(gè)過(guò)程：

1. 取材與速凍

新鮮取材：迅速?gòu)纳矬w中獲取組織樣本，以減少死后變化對(duì)組織結(jié)構(gòu)和抗原活性的影響。

組織處理：將組織塊平放于特制容器內(nèi)，如軟塑瓶蓋或小盒，直徑約2cm，對(duì)于小組織塊可加入OCT（Optimal Cutting Temperature）包埋劑，以保持組織形態(tài)。

速凍：使用液氮或干冰-丙酮混合物快速冷凍組織，確保組織迅速冰結(jié)成塊，減少冰晶損傷。

2. 切片準(zhǔn)備

恒冷箱切片：將冷凍的組織塊置于切片機(jī)的冷凍臺(tái)上，調(diào)節(jié)至適宜溫度（-15℃至-20℃），使用專用刀片進(jìn)行切片，厚度通?？刂圃?/span>4-10微米。

組織貼片：切好的薄片需立即貼附在預(yù)冷的載玻片上，確保組織片的完整性和位置固定。

3. 固定與處理

固定：切片后，室溫晾干，然后用冷丙酮固定10分鐘，以穩(wěn)定細(xì)胞結(jié)構(gòu)和抗原。

洗滌：用PBS（磷酸鹽緩沖液）洗滌3次，每次5分鐘，去除固定劑。

抗原修復(fù)：對(duì)于某些需要抗原修復(fù)的實(shí)驗(yàn)，將切片置于特定的修復(fù)液（如EDTA）中，通過(guò)微波或煮沸處理，恢復(fù)被固定劑封閉的抗原位點(diǎn)。

4. 阻斷與封閉

內(nèi)源性酶抑制：使用3%過(guò)氧化氫溶液在室溫下避光孵育25分鐘，以減少內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的干擾。

封閉：用BSA（牛血清白蛋白）或正常動(dòng)物血清在組織周圍畫圈封閉，防止非特異性結(jié)合，室溫下封閉30分鐘。

5. 抗體孵育

一抗孵育：將切片置于含有適當(dāng)稀釋的一抗的溶液中，4°C孵育過(guò)夜，以確保充分結(jié)合目標(biāo)抗原。

二抗結(jié)合：洗滌去除未結(jié)合的一抗后，加入標(biāo)記的二抗（如HRP或熒光標(biāo)記），室溫孵育一定時(shí)間。

6. 顯色與染色

DAB顯色或熒光染色：對(duì)于DAB顯色，經(jīng)過(guò)二抗處理后，使用DAB試劑顯色，觀察到棕色沉淀即為陽(yáng)性反應(yīng)。對(duì)于熒光染色，直接觀察熒光信號(hào)。

核染色：通常使用DAPI進(jìn)行核染色，以提供細(xì)胞核的定位信息。

7. 結(jié)果觀察與分析

干燥與封片：切片干燥后，使用中性樹膠或其他封片劑封片，防止熒光淬滅。

顯微鏡檢查：在熒光顯微鏡或光學(xué)顯微鏡下觀察，記錄圖像，分析抗原分布或細(xì)胞結(jié)構(gòu)特征。

注意事項(xiàng)

溫度控制：整個(gè)過(guò)程中，特別是切片和固定步驟，溫度控制至關(guān)重要，以避免組織損傷和抗原損失。

操作精細(xì)：每一步操作都需細(xì)致，避免組織片的損壞或抗原的非特異性結(jié)合。

標(biāo)準(zhǔn)化流程：確保每一步的條件（如固定時(shí)間、抗體濃度）標(biāo)準(zhǔn)化，以提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。

評(píng)論 / 文明上網(wǎng)理性發(fā)言
12條評(píng)論
全部評(píng)論 / 我的評(píng)論
最熱 /  最新
全部 3小時(shí)前 四川
文字是人類用符號(hào)記錄表達(dá)信息以傳之久遠(yuǎn)的方式和工具?，F(xiàn)代文字大多是記錄語(yǔ)言的工具。人類往往先有口頭的語(yǔ)言后產(chǎn)生書面文字，很多小語(yǔ)種，有語(yǔ)言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國(guó)家和民族的書面表達(dá)的方式和思維不同。文字使人類進(jìn)入有歷史記錄的文明社會(huì)。
點(diǎn)贊12
回復(fù)
全部
查看更多評(píng)論
相關(guān)文章

BET氣體吸附原理及其技術(shù)發(fā)展

2025-02-21

熱重分析（TG-DTG）曲線的幾種解析方法

2023-12-26

一文詳解掃描電子顯微鏡(SEM)的工作原理及應(yīng)用技術(shù)

2023-10-08

一文詳細(xì)介紹he染色的基本原理、實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)

2023-11-23

接觸角測(cè)試（CA）的原理、樣品制備要求及實(shí)際應(yīng)用

2023-11-16

恒電流間歇滴定法GITT的基本原理以及測(cè)試教程

2022-08-12

項(xiàng)目推薦/Project
免疫組化（IHC）

免疫組化（IHC）

免疫熒光（IF）

免疫熒光（IF）

冷凍切片

冷凍切片

熱門文章/popular

基礎(chǔ)理論丨一文了解XPS（概念、定性定量分析、分析方法、譜線結(jié)構(gòu)）

手把手教你用ChemDraw 畫化學(xué)結(jié)構(gòu)式：基礎(chǔ)篇

晶體結(jié)構(gòu)可視化軟件 VESTA使用教程（下篇）

【科研干貨】電化學(xué)表征：循環(huán)伏安法詳解（上）

電化學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)之電化學(xué)工作站篇 （二）三電極和兩電極體系的搭建 和測(cè)試

【科研干貨】電化學(xué)表征：循環(huán)伏安法詳解（下）

微信掃碼分享文章
夜夜躁日日躁狠狠躁综合网-天堂岛国av无码免费无禁网站- BD国语完整版观看 精品福利视频免费一区二区-操穴视频日本 | 国产色无码网站无码视频在线-海量资源欢迎观影体验 -名器好紧老师少妇-黑人硕大H名器 | 本庄優花AV101无码播放-一本加勒比hezyo无码人妻-国产亚洲欧美在线专区-水菜丽の黑人在线播放 | 黑人videos巨大hd粗暴的剧情简介-人妻熟妇91Porn 九色-大香蕉中文第三页-中文字幕150页 | 日美成人插入-一极片在线-人妖和人妖互交性xxxx视频-操肉丝美女 精品人妻一区二区三区久久迅雷-日本多毛胖熟妇-高潮喷水的网站 日韩欧美五区 -国产美女自卫网站 | 国产日韩精品欧美一区喷-欧美性网站,丁香五月欧美成人-国模大胆操逼-91PORNY九色91啦中文 | 美足AV电影-九九九调教美女-初撮五十路丰满熟妇-淫大师av | 色人阁。-97干熟女-尹人久久大香找蕉综合影院-国产精品美女www爽爽爽视频 | 一本加勒比HEZYO波多野结衣-完美身材国产欧美日韩-96欧美激情一区二区A片成人-天天舔狠狠爱 | 巨乳快播激情-美女自慰vk-xxxx黄色。-无码人妻aⅴ一区二区三区色戒乐 | 国产敌伦免费视频内射村妇-jIzz丰满熟妇乱-北条麻妃熟女人妻-东北熟女4P | 嗯～用力啊～嗯～c我～腐文-人妻视频一区二区三区免费-久久国产精品一区二区无尽3DH-裸体撒尿AAAAAA片 | 国产又粗又黄又爽又硬P站-日韩在线 np-欧美日韩淫荡女人-3B肉蒲团之四虎影库之嫩嫩草 | 日本人内射网站-青青av影院-999国产毛片动漫-中国妇女操穴视频 | 自产一区二区三区国产-ziwei看的网站-国产日产欧产精品精品推荐在线-东凛 色情影片 - 8MAV | 亚洲春色古典小说自拍-水野优香成人无码电影-国产精品JIZZ在线观看无码-免费色色 | 看看农村老逼偷拍-专约老熟女丰满探花-百合依人网-免费va不卡国产高清大片在线 | 日韩亚洲欧美www3344男同-中文小草第一夜-古风成人毛片-日本熟女乱交 | 操穴网站-日韩在线视频精品店在线日本亚洲A-熟妇美女-亚洲日韩av激情 | 熟女人妻喷水-动漫精品无码av-美女富婆享受性按摩的毛片-XXX欧美肥富婆BBW免费 | 北条麻妃《邻居人妻》-熟妇24p-伊人网狼人干-美女在线干你 | 人伦片无码中文字幕-国产中文99视频在线观看-男男Gay叫床啪啪无码-国产剧日韩免费观看 精品国产原创超清无码网站 | 2021亚洲国产精品无码-北条麻妃五十路-国产美女裸体无遮挡多久免费视频-免费追剧在线观看 久久91精品国产一区二区 | 口18av在线免费-女人自慰 高清免费网站-99久久精品视香蕉蕉 亚洲色婷婷久久99精品-美女裸体被操 欧美一级黑人-中国熟妇4567-操东北女人的视频-秋霞A级片 | freevido国产-导航色一二三三网-狼人大香蕉99-国产女主播精品大秀系列 | 口18av在线免费-女人自慰 高清免费网站-99久久精品视香蕉蕉 亚洲色婷婷久久99精品-美女裸体被操 欧美一级黑人-中国熟妇4567-操东北女人的视频-秋霞A级片 | 偷窥自拍女人性爱的视频-gogogo免费完整国语版首叶i 日韩欧美亚洲国产精品字幕久久久-久久久久人妻一区精品-久久综合久久 | 国内精品久久久久久久久齐齐-国产美女做爱的动态视频网站-国产熟睡乱子伦视频在线观看 -91妓女 | 日本娇小的学生BBw-tube24另类右手影院-狼人就干网-国产自慰TUBE | www.色喵AV.com-好av不卡在线看-国产精品久久久久精品日日剧情-国产品禁视频免费观看 | 班长摸着自己的胸 说哎太小了-伊人电影色-美女自慰网址在线免费观看使用-国产一二三四五 | 精品一区二区不卡无码av-欧美99999-JIZZ8性黑人-日韩精品射精管理在线观看 | 一本色道久久综合狠狠躁的推荐-黄色三极城人短片-韩日一-无码淫片 | 欧美搡bbbbb搡bbbbb-绿帽三区-男人色天堂-欧美熟女老司机人妻 | av.ccc黑人-EEUSS免费鲁丝无码下属一级-国产人成精品午夜在线观看为您提供优质国产-色花堂无码影片在线观看 | 多男混交群体交乱嗯啊-女人叫床娇喘高潮录音声mp3-五十路电车女-国产精品亚洲一区二区av | 一本一道在线-18禁影库-欧美破处TV-另类91贱奴女m被主人调教 | 艹中国美女-午夜探花约气质美女-[3D]同人精品动漫一区-www。色小姐。com | 黑人操亚洲女-自慰摸擦大荫蒂毛茸茸电影-五月天涩涩-精品第一国产综合精品蜜芽 | 亚日韩在线观看片免费人成视频-亚洲国产综合人成综合网站00-日无码一区二区-国产变态深喉囗交AV 欧美性大战久久久久久的安居码-大奶子婷婷-4k日本电影免费 亚洲精品无码久久毛-欧美亚在线视频 | 国产在线精品一区二区-国产92页-久操影视在线-玩少妇BB视频 |
+

你好，很高興為您服務(wù)！

發(fā)送