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藥物分析中液相色譜柱的常見(jiàn)問(wèn)題盤(pán)點(diǎn)
來(lái)源:測(cè)試GO 時(shí)間:2022-11-15 14:00:24 瀏覽:3250次

Q1、什么是反相柱、正相柱?

 液相色譜儀

答:“反相”和“正相”的概念是液相色譜法早期提出的概念,當(dāng)時(shí)鍵合相色譜柱尚未出現(xiàn),固定相被涂覆在載體表面,極易流失,為此科學(xué)家對(duì)流動(dòng)相使用給出了合理的建議:流動(dòng)相極性與固定液極性應(yīng)具有較大差別,以減少固定液流失。固定相極性弱于流動(dòng)相時(shí)的液相色譜法被稱(chēng)為反相色譜法,固定相極性強(qiáng)于流動(dòng)相時(shí)的液相色譜法被稱(chēng)為正相色譜法。盡管目前鍵合相色譜柱已成為主流,但這一概念在色譜方法開(kāi)發(fā)、預(yù)測(cè)出峰順序等方面具有重要意義。

 

由上面的介紹可知具體的色譜方法、色譜柱屬于正相還是反相不僅取決于固定相極性,同時(shí)還取決于流動(dòng)相極性。C18(硅膠鍵合十八烷基硅烷)、C8(硅膠鍵合辛基硅烷)、PH(硅膠鍵合苯基硅烷)等色譜柱,由于固定相極性極低,比目前已知的任何流動(dòng)相的極性都要低,因而是標(biāo)準(zhǔn)的反相柱;

 

Silica(硅膠)、NH2(硅膠鍵合氨丙基硅烷)具有較高的極性,主要用于分離帶有極性基團(tuán)的化合物,所用流動(dòng)相的極性通常低于這些固定相,因而是標(biāo)準(zhǔn)的正相柱。CN(硅膠鍵合腈丙基)的極性適中,當(dāng)流動(dòng)相極性超過(guò)CN時(shí),它屬于反相柱,反之則是正相柱。

 

Q2、色譜柱規(guī)格對(duì)分析結(jié)果會(huì)產(chǎn)生何種影響?

 

答:色譜柱內(nèi)徑?jīng)Q定載樣量,載樣量與內(nèi)徑的平方成正比;色譜柱長(zhǎng)度與塔板數(shù)成正比,與柱壓成正比;粒徑影響渦流擴(kuò)散相,粒徑越小渦流擴(kuò)散相越小,柱效越高,粒徑與柱效近似成反比;粒徑越小,壓力也越大,壓力與粒徑的平方成反比。填料孔徑對(duì)分析對(duì)象的分子量有限制,當(dāng)孔徑為分析物尺寸的5倍以上時(shí),分析物才能順利通過(guò)孔隙,孔徑處于60~120 ?的色譜柱適用于相對(duì)分子量小于10000的分析物,孔徑為300 ?的色譜柱可以滿(mǎn)足分子量處于10000以上的大分子化合物分析。 

 

Q3、柱床塌陷和鍵合相塌陷

 

答:柱床塌陷是指色譜柱使用一段時(shí)間后色譜柱入口處的柱床產(chǎn)生可見(jiàn)的空隙。該空隙的存在增大了死體積,會(huì)導(dǎo)致色譜柱柱效下降。造成柱床塌陷的原因如下:

其一,色譜柱填裝時(shí)的壓力過(guò)低,填裝不緊密,在高壓下使用一段時(shí)間,開(kāi)始出現(xiàn)空隙;

其二,操作壓力超出色譜柱填料的耐壓值,導(dǎo)致填料顆粒破碎產(chǎn)生空隙;

其三,流動(dòng)相溶解填料導(dǎo)致空隙出現(xiàn)。鍵合相塌陷是指由于流動(dòng)相極性與鍵合相極性相差太大,鍵合相無(wú)法在流動(dòng)相中充分伸展而倒伏、纏結(jié)在一起,比如普通C18在純水相條件下。相塌陷會(huì)導(dǎo)致色譜柱對(duì)化合物的保留不足。


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文字是人類(lèi)用符號(hào)記錄表達(dá)信息以傳之久遠(yuǎn)的方式和工具?,F(xiàn)代文字大多是記錄語(yǔ)言的工具。人類(lèi)往往先有口頭的語(yǔ)言后產(chǎn)生書(shū)面文字,很多小語(yǔ)種,有語(yǔ)言但沒(méi)有文字。文字的不同體現(xiàn)了國(guó)家和民族的書(shū)面表達(dá)的方式和思維不同。文字使人類(lèi)進(jìn)入有歷史記錄的文明社會(huì)。
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