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如何在流式細(xì)胞儀上機(jī)前準(zhǔn)備好你的樣品?
來源:測試GO 時間:2022-11-11 14:50:57 瀏覽:5644次

樣品的制備是進(jìn)行流式細(xì)胞分析術(shù)的關(guān)鍵。流式細(xì)胞儀上機(jī)前樣品的制備有以下幾點:

 

流式細(xì)胞儀 

 

1、 細(xì)胞需懸浮于培養(yǎng)基或PBS中(含1%的血清或0.5%BSA);上機(jī)前需用200目篩網(wǎng)過濾細(xì)胞,為了避免細(xì)胞粘連,可以添加1mmol/LEDTA

2、 如果分選后的細(xì)胞用于繼續(xù)培養(yǎng),需確保樣本無菌,可適量添加抗生素。

3、 推薦樣品體積為200-500μL。用于分析的樣品推薦濃度為0.5-5×106cells/mL,用于分選的樣本推薦濃度為106-107cells/mL。為提高分選的速率,可以先準(zhǔn)備盡量濃的樣本(大于107cells/mL),上機(jī)后根據(jù)分選效率再用培養(yǎng)基或緩沖液稀釋成合適的濃度。

 

二、 分選需準(zhǔn)備的材料:

 

1、 接收細(xì)胞的液體:完全培養(yǎng)基、血清、適合細(xì)胞存活的自制緩沖液、裂解液。

2、 接收的容器:1.5mL Eppendorf管(至少加入100μL液體)、5ml BD Falcon 352054流式管(至少加入1mL液體)、15mL離心管(至少加入2 mL液體)、96孔培養(yǎng)板(加入100μL培養(yǎng)基)、PCR管(板)(加入4-10μL預(yù)擴(kuò)增液)。

3、 每次上機(jī)需要準(zhǔn)備空白對照(未染色的樣本)、同型對照和每一種熒光通道的單染樣品來調(diào)節(jié)電壓和補償(在其他儀器上獲取的電壓值和補償值不通用);為了圈門精確及驗證實驗,用戶可以準(zhǔn)備FMO對照和陽性對照。

4、 用戶可以在分析(選)前把其他儀器上的流式圖發(fā)給工作人員,為分析(選)做更充分的準(zhǔn)備。

5、 使用96PCR板接收單細(xì)胞的用戶需要攜帶未使用的96PCR板及透明的封板膜。


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全部 3小時前 四川
文字是人類用符號記錄表達(dá)信息以傳之久遠(yuǎn)的方式和工具。現(xiàn)代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產(chǎn)生書面文字,很多小語種,有語言但沒有文字。文字的不同體現(xiàn)了國家和民族的書面表達(dá)的方式和思維不同。文字使人類進(jìn)入有歷史記錄的文明社會。
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